cck8实验原理

cck8实验原理

WST-8、电子耦合试剂、脱氢酶、甲瓒产物

‌CCK-8实验的原理是基于‌WST-8这种水溶性四唑盐，在电子耦合试剂（如活细胞中的NAD+）的存在下，被细胞线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazan）。‌这一还原过程产生的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比，因此可以通过测量甲瓒产物的颜色变化来反映细胞的增殖和毒性情况。‌‌WST-8在电子耦合试剂存在的情况下，被线粒体内的脱氢酶还原生成橙黄色的甲瓒产物。‌这一过程产生的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比，因此可以通过测量甲瓒产物的颜色深浅来反映细胞的增殖和毒性情况。具体来说，细胞增殖越多越快，颜色越深；细胞毒性越大，颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系，因此可以利用这一特性进行细胞增殖和毒性分析。‌CCK-8实验的检测波长通常为450nm‌，可以通过酶标仪在450nm波长处测定OD值，从而间接反映活细胞的数量。此外，CCK-8实验具有一些优势，例如对酚红和血清不会造成干扰，细胞毒性低，可以在不同时间反复用酶标仪读数，找到最佳测定时间。