透射电镜制样

透射电镜制样

‌透射电镜样品制备是一个复杂的过程，旨在确保样品能够满足透射电镜的观察要求。以下是透射电镜样品制备的主要步骤和注意事项：取材：将样品从试管中取出，放入培养皿中，用刀片将样品切块，组织块小于一立方毫米。‌固定：使用2.5%的固定液固定样品两个小时以上，然后用PBS缓冲液漂洗三次，每次15分钟。脱水：使用不同梯度的乙醇和丙酮进行脱水，30%-90%的乙醇脱水15分钟，100%乙醇和100%丙酮脱水20分钟两次。包埋：使用包埋模具包埋样品，用牙签将样品挑出转移到新的试管中，放入聚合箱中固化12个小时。切片：首先用刀片进行粗修块，接着放在超薄切片机上进行细修块，最后是超薄切片，使样品的厚度达到50到70纳米。离子减薄：在高真空设备腔体中，利用‌Ar离子枪发射一定能量的聚焦Ar离子束对样品表面特定区域进行连续冲击，实现研磨减薄样品的方法。‌注意事项：所有容器及玻璃棒等应是清洁和干燥的。‌配制过程中应搅拌均匀，使用过程中应避免异物，特别是水、乙醇、丙酮等混入包埋剂。配制好的包埋剂应密封保存，避免受潮。剩余包埋剂可密封并储存在-10—-20℃冰箱中，延长其使用期。样品裁剪成直径3mm的圆片，研磨抛光至厚度低于100微米的圆片，然后使用凹坑仪单面凹坑至圆片中心厚度为10-30微米。透射电镜利用穿透样品的电子束成像，要求样品对入射电子束是“透明”的；样品必须很薄，使电子束能够穿透，一般在10~200 nm左右；不含有水分或其它易挥发物；样品应有足够的强度和稳定性；样品不能含有磁性。‌为了更深入了解透射电镜样品制备的详细步骤和注意事项，可以观看相关视频教程：