引物二聚体

引物二聚体

‌引物二聚体是引物3'端碱基在Taq酶作用下互补结合并延伸形成的小分子量双链DNA片段。它的形成主要是由于引物之间或引物本身3'端碱基的互补组合。引物二聚体的大小可以从几十bp到几百bp不等，因此，当目的条带的分子量较小时，电泳后看到的结果可能是引物二聚体而非目的条带。为了区分引物二聚体和目的条带，可以通过在电泳时添加一组对照来实现，即用H2O代替模板进行电泳，如果泳道中出现条带，则说明形成了引物二聚体。引物二聚体的出现是‌PCR过程中不可避免的现象，但可以通过一些方法减少其形成。例如，重新设计引物、增加模板使用量、降低引物浓度、使用适当长度的引物、提高退火温度、减少循环次数以及在反应混合物中加入少量的甘油或DMSO等。这些方法可以有效降低引物二聚体的浓度，从而提高PCR实验的准确性和可靠性。‌